1907年(光绪三十三年)7月6日，光复会领导的首次安庆起义爆发。徐锡麟以安庆巡警处会办兼巡警学堂监督的身份，暗中联络会党，约定在本年7月8日乘巡警学堂举行毕业典礼时进行突然袭击，杀掉省文武大官，占领安庆，然后与秋瑾的浙东起义军共同攻打南京，从事反清武装斗争。
因叶仰高叛变，安徽巡抚恩铭已掌握党人名单，毕业典礼突然提前于6日举行，会中徐锡麟用短枪击毙安徽巡抚恩铭，会场哗然，其余文武官员慌忙逃走。徐锡麟与马宗汉，陈伯平及巡警学生百余人很快占领了军械所，后被前来镇压的清军包围，激战四小时失败。陈伯平战死，徐锡麟、马宗汉被捕。
审讯中，徐锡麟抗对不屈。审讯他的官员说：“你可知罪？明日你就要被开膛剖心肝了！”徐锡麟闻语，大笑说：“为了革命我即使身为千万片，亦在所不惜。区区心肝，何屑顾及！”
当晚，徐锡麟被杀。临刑前，先拍小影，他神色自若地说：“功名富贵，非所快意，今日得此，死且不悔矣！”徐锡麟终年34岁。
徐锡麟先生为了革命不惜牺牲自己的生命，这种革命精神，民族精神值得我们后人敬仰。先生离开我们已经足足一百多年了，但他依然活在我们心中，我们永远怀念他。我们还要学习他为了祖国，为了人民不屈战斗，不怕牺牲的爱国主义精神。我们生活在和平年代是多么幸福。做为学生，我们要好好学习，学好扎实本领，将来把祖国建设得更加繁荣富强，让我们的祖国屹立在世界强国之列。这是我们少年一代的神圣责任！