瓢虫弟弟：喜欢和强大的昆虫进行挑战，聪明可爱。
苍蝇军队：老喜欢在中午嗡嗡的在空中巡逻，让虫虫难以入睡；有时又是瓢虫弟弟挑战的对象。傻蜘蛛先生：有八条又细又长的脚，许多个小眼睛。做事笨手笨脚，总是感觉有点痴痴傻傻的。蜗牛弟弟；有一段时间它想摆脱它那笨重的壳，成为急速蜗牛。蚊子妹妹：好几次被傻蜘蛛先生捉住又有好几次从蜘蛛手里逃脱。苍蝇妹妹：有一次它被一个玻璃杯子罩住了，又被糊涂的蜘蛛放走了。
蚊子：有一次，误吃了辣椒粉全身充满了劲儿，竟然冲上了高空，好似火箭。蜜蜂、蜻蜓：经常是瓢虫弟弟的挑战的对象。