体外转录的步骤有哪些

2024-10-13下载文档一键复制全文

  转录通常发生在生物体内,如果我们将含有RNA转录酶、NTP等条件,在体外无细胞系统中,用DNA作为模板,模仿体内转录过程生成RNA,这样的技术则能够控制转录的基因、转录的过程和转录后RNA的用途,该技术被称为体外转录。

  体外转录的步骤如下:

  1、 提取cDNA质粒;

  2、 线性化质粒;

  3、 纯化质粒: 加等体积的Tris苯酚氯仿到100微米限制内切酶消化体系,涡旋振荡20秒, 13000克离心5分钟。上清转移,加入2倍体积无水乙醇和1比10体积的的

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